Innhold
PCR er en metode som brukes av forskere til å lage millioner av kopier av et segment av DNA. Polymeraser - en type protein enzym - bidra til å produsere nye segmenter. Forskere bruker ofte Taq-polymerase i PCR.
historie
Taq-polymerasen kommer fra bakterien Thermus aquaticus, som lever i termisk vann. Kary Mullis og Fred Faloona utviklet PCR i midten av 1980-tallet ved å bruke opprinnelig Escherichia coli-polymerasen, men forskere begynte snart å bruke Taq i PCR fordi det var mer motstandsdyktig mot høye temperaturer.
funksjon
PCR involverer trinnene med denaturering, glødning og replikasjon, vanligvis gjentatt 20 til 30 ganger. Denaturering separerer DNA-strenget i isolerte tråder. I annealingstrinnet binder primrene til DNA-segmentene som skal kopieres. Taq polymerase begynner å fungere på replikeringstrinnet: polymerasen samler, fra hver enkelt DNA-streng merket av en primer, en ny dobbelstreng.
fordeler
De høye temperaturene som kreves for å denaturere DNA, ødelagde E. coli-polymerasen som ble opprinnelig anvendt i PCR, hvilket nødvendiggjør tilsetning av ytterligere enzym til hver syklus. Taq polymerase kan tåle disse temperaturene, slik at forskere nå kan gjøre flere PCR-sykluser automatisk.
betraktninger
Taq-polymerase har en relativt høy DNA-fordoblingsfeilrate. Andre polymeraser som er stabile ved høye temperaturer, har lavere feilfrekvenser, men Taq er fortsatt den mest brukte på grunn av sin pålitelighet og allsidighet.